मूळ परिचय
लाल रक्तपेशी काढून टाकण्यासाठी एरिथ्रोसाइट लायसेट ही सर्वात सोपी आणि सोपी पद्धतींपैकी एक आहे, म्हणजेच, लाल रक्तपेशी लाइसेटसह विभाजित करणे, ज्यामुळे केंद्रक पेशींना नुकसान होत नाही आणि लाल रक्तपेशी पूर्णपणे काढून टाकता येतात. लायसेट क्लीव्हेज ही एक सौम्य लाल रक्तपेशी काढून टाकण्याची पद्धत आहे, जी मुख्यत्वे एन्झाईम पचनाने विखुरलेल्या ऊतक पेशींचे पृथक्करण आणि शुद्धीकरण, लिम्फोसाइट्सचे पृथक्करण आणि शुद्धीकरण आणि ऊतक प्रथिने आणि न्यूक्लिकच्या प्रयोगांमध्ये लाल रक्तपेशी काढून टाकण्यासाठी वापरली जाते. ऍसिड काढणे. लाल रक्तपेशींच्या लायसेटद्वारे प्राप्त झालेल्या ऊतींच्या पेशींमध्ये लाल रक्तपेशी नसतात, आणि त्या पुढे प्राथमिक संवर्धन, सेल फ्यूजन, प्रवाह सायटोमेट्री, न्यूक्लिक अॅसिड आणि प्रथिने वेगळे करणे आणि काढणे इत्यादीसाठी वापरल्या जाऊ शकतात.
वापरासाठी सूचना
ऊतक सेल नमुना
1. ताजे उती स्वादुपिंड/एन्झाइम किंवा कोलेजेनेस द्वारे पचले गेले आणि एकल पेशी निलंबनात विखुरले गेले आणि सेंट्रीफ्यूगेशनद्वारे सुपरनेटंट टाकून दिले गेले.
2. रेफ्रिजरेटरमधून ELS lysate 4â वाजता घ्या, सेल प्रिसिपिटेटमध्ये 1:3-5 च्या प्रमाणात ELS lysate जोडा (1ml च्या 1ml मध्ये lysate 3-5ml जोडा), हलक्या हाताने फुंकून मिक्स करा.
3. 800-1000rpm वर 5-8 मिनिटे अपकेंद्रित करा आणि वरचा लाल स्पष्ट द्रव टाकून द्या.
4. अवक्षेपित भाग गोळा करून हँकचे द्रावण किंवा सीरम-मुक्त कल्चर द्रावणाने 2-3 वेळा सेंट्रीफ्यूज केले.
5, क्रॅकिंग पूर्ण/पूर्ण नसल्यास चरण 2 आणि 3 ची पुनरावृत्ती केली जाऊ शकते.
6. त्यानंतरच्या प्रयोगांसाठी रिस्पेंशन सेल; जर आरएनए काढला असेल, तर DEPC पाण्याचा वापर करून पायरी 4 पासून तयार केलेल्या द्रावणात असे करणे चांगले.
लाल रक्तपेशींचे जीवन चक्र फारच लहान असते, फक्त 120 दिवस, परंतु ते रक्त खूप लवकर पुनरुत्पादित करतात, आणि या प्रकरणात ते विशेषतः पेशी विभाजन करण्यास सक्षम आहेत, आणि त्या सर्वांमध्ये सर्वात जलद विभाजित पेशी आहेत, म्हणून ही पेशी खूप मौल्यवान आहे, त्यामुळे सेल कल्चरसाठी ते खूप उपयुक्त आहे. हे अगदी सोपे आहे, त्यात कोणतेही ऑर्गेनेल्स नसतात, फक्त पेशी पडदा आणि प्रथिने असतात.