"आपल्या सर्वांना माहित आहे की, पीसीआर ही बायोकेमिकल प्रयोगशाळांमध्ये मूलभूत प्रायोगिक पद्धत आहे." प्रायोगिक परिणाम नेहमीच असमाधानकारक असतात, जे PCR प्लास्टिकच्या उपभोग्य वस्तूंच्या किंचित दूषिततेमुळे किंवा इनहिबिटरच्या परिचयामुळे प्रायोगिक हस्तक्षेपामुळे असू शकतात. आणखी एक अतिशय महत्त्वाचे कारण आहे: उपभोग्य वस्तूंच्या अयोग्य निवडीचा प्रायोगिक परिणामांवरही मोठा प्रभाव पडेल.
पीसीआर प्रयोगांच्या परिणामांवर परिणाम करणारी अनेक कारणे आहेत: सहसा खालील 7 प्रकार असतात.
1. प्राइमर्स: प्राइमर्स हे पीसीआरच्या विशिष्ट प्रतिक्रियेची गुरुकिल्ली आहेत आणि पीसीआर उत्पादनांची विशिष्टता प्राइमर्स आणि टेम्पलेट डीएनए यांच्यातील पूरकतेच्या डिग्रीवर अवलंबून असते;
2. एंजाइम आणि त्याची एकाग्रता;
3. dNTP ची गुणवत्ता आणि एकाग्रता;
4. टेम्प्लेट (लक्ष्य जनुक) न्यूक्लिक अॅसिड;
5. Mg2+ एकाग्रता;
6. तापमान आणि वेळ सेट करणे;
7. चक्रांची संख्या;
8. उपकरणे, उपभोग्य वस्तू इ.
प्रभाव टाकणाऱ्या अनेक घटकांपैकी उपभोग्य वस्तू हा एक अतिशय महत्त्वाचा आणि सहज दुर्लक्षित घटक आहे.
अनेक प्रकार आहेत
पीसीआर उपभोग्य वस्तू: 8-ट्यूब, लो-व्हॉल्यूम ट्यूब, स्टँडर्ड ट्यूब, नॉन-स्कर्टेड, सेमी-स्कर्टेड, फुल-स्कर्टेड आणि पीसीआर आणि क्यूपीसीआर प्लेट्सची मालिका. निवडणे खूप अवघड आहे, आणि बर्याच सामान्य समस्या आहेत, चला प्रत्येकजण निवडलेल्या समस्यांकडे एक नजर टाकूया
पीसीआर उपभोग्य वस्तू, आणि ते कसे सोडवायचे?
का आहेत
पीसीआर उपभोग्य वस्तूसाधारणपणे PP बनलेले?
उत्तर: PCR/qPCR उपभोग्य वस्तू सामान्यत: पॉलीप्रॉपिलीन (PP) चे बनलेले असतात, कारण ते जैविक दृष्ट्या जड पदार्थ आहे, पृष्ठभागावर जैव-रेणूंना चिकटून राहणे सोपे नसते आणि त्यात चांगला रासायनिक प्रतिकार आणि तापमान सहनशीलता असते (121 अंशांवर ऑटोक्लेव्ह करता येते) जीवाणू आणि थर्मल सायकलिंग दरम्यान तापमान बदल देखील सहन करू शकते). ही सामग्री सामान्यत: अभिकर्मक किंवा नमुन्यांच्या थेट संपर्कात असते, म्हणून उत्पादन आणि तयारी प्रक्रियेदरम्यान उच्च-गुणवत्तेची सामग्री आणि चांगली प्रक्रिया तंत्र निवडणे आवश्यक आहे.