इष्टतम सेल वाढ आणि प्रायोगिक परिणाम सुनिश्चित करण्यासाठी योग्य कल्चरवेअर निवडणे महत्वाचे आहे. सेल कल्चर वेसल्स निवडताना, सेल प्रकार, तुमच्या संस्कृतीचा विशिष्ट उद्देश, संस्कृतीचे प्रमाण, संस्कृती माध्यमाचा प्रकार, वाहिन्यांचे साहित्य आणि आकार, पृष्ठभागावरील उपचार, योग्य झाकण यासारख्या घटकांचा विचार करणे महत्त्वाचे आहे. गॅस एक्सचेंज आणि तुमच्या प्रयोगशाळेच्या उपकरणांसह त्यांची सुसंगतता.
योग्य सेल कल्चर पोत निवडताना विचारात घेण्यासाठी मुख्य घटक येथे आहेत
1. पेशींच्या प्रकारावर आधारित सेल कल्चर पात्र निवडा
अनुयायी पेशी
या पेशींना जोडण्यासाठी आणि पसरण्यासाठी पृष्ठभागाची आवश्यकता असते. चिकट पेशींसाठी, आपल्याला पृष्ठभागाच्या क्षेत्रासह वेसल्सची आवश्यकता असेल जे सेल संलग्नक आणि वाढीसाठी पुरेशी जागा प्रदान करते.
उदाहरणे टिश्यू कल्चर-ट्रीटेड फ्लास्क, पेट्री डिश आणि मल्टी-वेल प्लेट्स.
निलंबन पेशी
या पेशी माध्यमात तरंगत वाढतात, त्यामुळे पृष्ठभागाचा विचार केला जात नाही.
2. आकारावर आधारित सेल कल्चर जहाज निवडा (वॉल्यूम क्षमता)
स्मॉल-स्केल कल्चर्स
लहान-प्रयोगांसाठी किंवा उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंगसाठी, लहान जहाजे आदर्श आहेत.
उदाहरणे मल्टी-वेल प्लेट्स (6, 24, 96-सेल कल्चर प्लेट्स),
पेट्री डिशेस, किंवा T25 फ्लास्क.
मोठ्या प्रमाणात संस्कृती
जर तुम्हाला मोठ्या प्रमाणात पेशी वाढवायची असतील तर मोठ्या वाहिन्या किंवा बायोरिएक्टर अधिक चांगले आहेत.
T75 आणि T175 सेल कल्चर फ्लास्क, बायोरिएक्टर किंवा सस्पेंशन सेल कल्चरसाठी स्पिनर फ्लास्कची उदाहरणे.
3. पृष्ठभागावरील उपचारांवर आधारित सेल कल्चर पोत निवडा
टिश्यू कल्चर-उपचारित पृष्ठभाग
सेल संलग्नकांना प्रोत्साहन देण्यासाठी वेसल्सवर पूर्व-उपचार केले जातात, ज्यामुळे ते अनुयायी पेशी प्रकारांसाठी योग्य बनतात. हे सामान्यतः कोलेजन, फायब्रोनेक्टिन किंवा इतर बाह्य मॅट्रिक्स घटकांसारख्या पदार्थांसह लेपित असतात.
गैर-उपचारित पृष्ठभाग
निलंबन संस्कृतींसाठी किंवा जेव्हा पेशींना पृष्ठभागावर चिकटून राहण्याची आवश्यकता नसते तेव्हा आदर्श. ते सहसा माध्यमात मुक्तपणे वाढणाऱ्या पेशींसाठी वापरले जातात.
4. सामग्रीवर आधारित सेल कल्चर पात्र निवडा
पॉलीस्टीरिन सामान्यतः मानक सेल कल्चर ऍप्लिकेशन्ससाठी वापरले जाते. हे स्पष्ट आहे, सहज व्हिज्युअल तपासणीस अनुमती देते आणि अनुयायी आणि निलंबन पेशी दोन्हीसाठी चांगले कार्य करते.
पॉली कार्बोनेट किंवा पॉलीप्रोपीलीनचा वापर विशिष्ट बायोरिएक्टर अनुप्रयोगांसाठी आणि अधिक लवचिकता किंवा विशिष्ट पृष्ठभागावरील उपचारांची आवश्यकता असलेल्या वाहिन्यांसाठी केला जातो.
किंमत आणि तुटण्यामुळे मानक टिश्यू कल्चरसाठी वापरला जाणारा ग्लास, काचेच्या वाहिन्या विशिष्ट अनुप्रयोगांसाठी किंवा मोठ्या प्रमाणात संस्कृतींसाठी योग्य असू शकतात.
फ्लास्क
सामान्य सेल कल्चरसाठी, टी-फ्लस्क (T25, T75, T150) सामान्यतः वापरले जातात. सपाट पृष्ठभाग सेल संलग्नक आणि वाढीसाठी चांगले क्षेत्र प्रदान करते. योग्य परिस्थिती राखल्यास ते अनुयायी पेशी आणि निलंबन संस्कृती दोन्हीसाठी वापरले जाऊ शकतात.
पेट्री डिशेस
लहान-प्रमाणातील संस्कृतींसाठी आणि निरीक्षणाची आवश्यकता असलेल्या प्रयोगांसाठी सामान्य, जसे की कॉलनी निर्मिती परीक्षण.
मल्टी-वेल प्लेट्स
हे उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग आणि लहान-प्रयोगांसाठी उपयुक्त आहेत. 6, 12, 24, 48 सह प्लेट्स,
96, किंवा 384 विहिरी उपलब्ध आहेत, आणि सेल-आधारित ऍसे, साइटोकाइन प्रकाशन, औषध चाचणी आणि इतर उच्च-थ्रूपुट अनुप्रयोगांसाठी आदर्श आहेत.
स्पिनर फ्लास्क
निलंबन सेल कल्चरसाठी वापरले जाते, विशेषत: मोठ्या खंडांमध्ये जेथे सेल वाढ टिकवून ठेवण्यासाठी आणि सेल क्लंपिंग टाळण्यासाठी नियंत्रित आंदोलन आवश्यक असते.
बायोरिएक्टर्स
मोठ्या प्रमाणात सस्पेंशन कल्चरसाठी, बायोरिएक्टर्स पर्यावरणीय परिस्थितींवर (उदा. पीएच, तापमान, ऑक्सिजनेशन) अधिक जटिल नियंत्रणास परवानगी देतात आणि बायोफार्मास्युटिकल मॅन्युफॅक्चरिंगसारख्या मोठ्या प्रमाणात उत्पादनासाठी वापरले जातात.
6. स्टेरिलिटी आणि वेंटिलेशनवर आधारित सेल कल्चर पोत निवडा
वंध्यत्व
जहाज निर्जंतुक आहे किंवा दूषित होऊ नये म्हणून निर्जंतुकीकरण केले आहे याची खात्री करा. बहुतेक व्यावसायिक कल्चर वेसल्स पूर्व-निर्जंतुकीकृत आहेत, परंतु नेहमी पॅकेजिंग तपासा.
वायुवीजन
काही जहाजे, जसे की फ्लास्क, दूषित होण्यापासून बचाव करताना हवेच्या देवाणघेवाणीसाठी परवानगी देण्यासाठी व्हेंटेड कॅप्स किंवा फिल्टरसह येतात. उच्च-घनतेच्या परिस्थितीत पेशींचे संवर्धन करताना हे आवश्यक आहे.
7. वापराच्या सोयीनुसार सेल कल्चर पोत निवडा
ऑटोक्लेव्हेबल विरुद्ध डिस्पोजेबल
काही कल्चर वेसल्स पुनर्वापरासाठी ऑटोक्लेव्ह केले जाऊ शकतात (उदा., काचेच्या बाटल्या, ठराविक प्लास्टिक फ्लास्क), तर काही एकेरी वापर आणि डिस्पोजेबल (उदा., प्लास्टिक पेट्री डिश, मल्टी-वेल प्लेट्स) आहेत.
हाताळणी आणि वाहतूक
वाहिन्यांमधील पेशींचे हस्तांतरण करण्याच्या सुलभतेचा विचार करा. उदाहरणार्थ, मल्टी-वेल प्लेट्सला स्वयंचलित पाइप्टरसारख्या उपकरणांसह सुलभ हाताळणीसाठी विशेष प्लेट्सची आवश्यकता असू शकते.
8. कल्चर मीडियम व्हॉल्यूमवर आधारित सेल कल्चर वेसल निवडा
संसाधने वाया न घालवता कल्चर माध्यमाची इच्छित मात्रा सामावून घेणारे जहाज निवडा. उच्च-खंड कल्चरसह काम करत असल्यास, मोठ्या फ्लास्क किंवा बायोरिएक्टर्स आवश्यक असू शकतात, तर लहान खंड सेल कल्चर डिश किंवा प्लेटसाठी योग्य आहेत.
9. खर्चाच्या विचारांवर आधारित सेल कल्चर जहाज निवडा
डिस्पोजेबल वि. पुन्हा वापरण्यायोग्य
डिस्पोजेबल प्लॅस्टिकची भांडी किफायतशीर असतात आणि दूषित होण्याचा धोका कमी करतात, परंतु मोठ्या प्रमाणावरील ऑपरेशनसाठी ते महाग असू शकतात. पुन्हा वापरता येण्याजोग्या काचेच्या भांड्यांची आगाऊ किंमत जास्त असते परंतु ते निर्जंतुकीकरण आणि अनेक वेळा पुन्हा वापरले जाऊ शकतात, ज्यामुळे दीर्घकालीन वापरासाठी ते अधिक किफायतशीर बनतात.
व्हॉल्यूम कार्यक्षमता
सामग्रीचा अपव्यय टाळण्यासाठी जहाजाचा आकार योग्य असल्याची खात्री करा, विशेषत: महाग वाढ माध्यम किंवा अभिकर्मक वापरताना.
10. विशिष्ट अनुप्रयोग आवश्यकतांवर आधारित सेल कल्चर पोत निवडा
इमेजिंग
जर तुम्हाला सूक्ष्मदर्शकाखाली पेशी व्हिज्युअलायझ करायच्या असतील, तर तुमच्या इमेजिंग सेटअपसाठी (उदा., उच्च सामग्रीच्या स्क्रीनिंगसाठी मल्टी-वेल प्लेट्स किंवा लाइव्ह-सेल इमेजिंगसाठी ग्लास-बॉटम डिशेस) ऑप्टिकली स्पष्ट सामग्री आणि योग्य परिमाण असलेली जहाजे निवडा.
नियंत्रित आंदोलन
सस्पेंशन सेल कल्चरसाठी, स्पिनर फ्लास्क किंवा बायोरिएक्टर्सचा विचार करा जे पेशींना समान रीतीने निलंबित ठेवण्यासाठी नियंत्रित आंदोलन प्रदान करतात.
निष्कर्ष
योग्य सेल कल्चर वेसल निवडण्यासाठी सेल प्रकार, कल्चर स्केल, सामग्रीची सुसंगतता आणि विशिष्ट प्रायोगिक गरजा यासह अनेक घटक संतुलित करणे आवश्यक आहे. चिकट पेशींना संलग्नकांना प्रोत्साहन देणारे पृष्ठभाग आवश्यक असतात, तर निलंबन पेशींना मोठ्या प्रमाणात आणि आंदोलनाचा फायदा होतो. छोट्या-छोट्या कामासाठी, मल्टी-वेल प्लेट्स किंवा टी-फ्लस्क पुरेसे असू शकतात, तर मोठ्या संस्कृतींना स्पिनर फ्लास्क किंवा बायोरिएक्टरची आवश्यकता असू शकते. जहाजे तुमची निर्जंतुकता आणि हाताळणीच्या गरजा पूर्ण करतात याची नेहमी खात्री करा आणि तुमच्या वापरावर आधारित खर्च-प्रभावीपणाचा विचार करा.
या घटकांचा विचार करून, तुम्ही तुमच्या सेल कल्चर आणि प्रायोगिक उद्दिष्टांसाठी योग्य परिस्थिती प्रदान करणारे इष्टतम पात्र निवडू शकता.